His-Tag магнитные частицы (сорбенты)
В дополнение к нашим агарозным анти-His-tag носителям для FPLC-колонок, мы так же производим магнитные частицы с теми же anti-his-tag лигандами:
1) Традиционный лиганд NTA – нитрилотриуксусная кислота.
2) Лиганд нового поколения AZUR с повышенной устойчивостью к EDTA – аналог лиганда используемого в сорбенте Cytiva Ni Sepharose excel и колонках HisTrap excel.
Кроме того, при необходимости возможно исполнение носителя с различными связанными ионами помимо традиционного Ni: Металл, с которым связан лиганд в хелатном комплексе может заметно влиять на аффинность и специфичность металл-хелатной хроматографии. Обычно действует следующее правило: чем выше выход белка, тем менее специфично его выделение. По увеличению специфичности (и, соответственно, уменьшению аффинности), ионы, как правило, располагаются в следующей последовательности: Cu2+, Ni2+, Zn2+, Co2+.
Магнитные сорбенты полностью изготавливаются нами – начиная от синтеза магнетита, покрытия агарозой и дальнейшей химической модификации.
Продукты
AbiFlow Magnetic 100 Ni-NTA Agarose
5% суспензия в консервирующем буфере
Каталожный номер | Фасовка, мл | Цена, руб | Срок изготовления |
|---|---|---|---|
FLO-921-102-2ML | 2 × 1 мл (100 мкл носителя) | 11 000 | В наличии |
FLO-921-102-5ML | 5 × 1 мл (250 мкл носителя) | 25 000 | В наличии |
FLO-921-102-10ML | 10 × 1 мл (500 мкл носителя) | 44 500 | В наличии |
Носитель AbiFlow Magnetic 100 Ni-NTA Agarose представляет собой магнитные микрочастицы, предназначенные для быстрой мелкомасштабной очистки и скрининга экспрессии белков с His-Tag меткой. Белки с полигистидиновой меткой захватываются с помощью иммобилизованных на смоле ионов никеля с последующим осаждением магнитных микрочастиц на магнитном штативе. Таким образом, магнитные частицы легко отделяются от жидкой фазы на каждом этапе протокола очистки, что значительно ускоряет процесс выделения белка. Очистку белка можно легко масштабировать, а также обрабатывать сразу несколько образцов параллельно.
AbiFlow Magnetic 100 Ni-NTA Agarose поставляется в виде 5% водной суспензии. Носитель доступен в упаковках трех размеров: 2 × 1 мл 5% суспензии, 5 × 1 мл 5% суспензии и 10 × 1 мл 5% суспензии. Таким образом, 1 мл 5% суспензии соответствует 50 мкл осажденного носителя. Этого объема достаточно для 5 независимых выделений белка с His-Tag меткой согласно рекомендованному протоколу.
Рекомендуемый протокол регенерации носителей на основе AbiFlow Ni-NTA Agarose
Характеристики
Параметр | Значение |
|---|---|
Матрица | Магнитная кросс-сшитая агароза, 4% |
Размер микросфер | 45-71 мкм |
Аффинность | His-Tag |
Назначение | Специфическое связывание и очистка белков с His-Tag меткой |
Лиганд | NTA |
Связанный ион | Ni2+ |
Стабильность хелатора | Стабилен в часто используемых водных буферах, 5 мМ ДТТ, 1 мМ ЭДТА, 20 мМ меркаптоэтаноле, 8 M мочевине, 6 M гуанидин гидрохлориде |
Хранение | +4 ОС |
Cite as:
The protein was purified using AbiFlow Magnetic 100 Ni-NTA Agarose beads (Abisense, Russia).
Ключевые слова
Magnetic Ni-NTA beads, His-Tag, protein purification
AbiFlow Magnetic 100 Ni-AZUR Agarose
5% суспензия в консервирующем буфере
Каталожный номер | Фасовка, мл | Цена, руб | Срок изготовления |
|---|---|---|---|
FLO-941-102-2ML | 2 × 1 мл (100 мкл носителя) | 11 000 | В наличии |
FLO-941-102-5ML | 5 × 1 мл (250 мкл носителя) | 25 000 | В наличии |
FLO-941-102-10ML | 10 × 1 мл (500 мкл носителя) | 44 500 | В наличии |
Рекомендуемый протокол регенерации носителей на основе AbiFlow AZUR Agarose
Характеристики
Параметр | Значение |
|---|---|
Матрица | Магнитная кросс-сшитая агароза, 4% |
Размер микросфер | 45-71 мкм* |
Аффинность | His-Tag |
Назначение | Специфическое связывание и очистка белков с His-Tag меткой |
Лиганд | AZUR: улучшенный тетрадентантный лиганд для His-Tag |
Связанный ион | Ni2+ |
Стабильность хелатора | Стабилен в часто используемых водных буферах, 1 M NaOH, 5 мМ ДТТ, 10 мМ ЭДТА (100 мМ ЭДТА в течение 2 часов), 20 мМ меркаптоэтаноле, 8 M мочевине, 6 M гуанидин гидрохлориде |
Хранения | +4 ОС |
Носитель AbiFlow Magnetic 100 Ni-AZUR Agarose предназначен для мелкомасштабной очистки и скрининга белков с гистидиновой меткой в случаях, когда образцы содержат восстанавливающие агенты или хелатирующие добавки (ДТТ, ЭДТА и т.п.).
Носитель выдерживает относительно высокие концентрации хелаторов и восстановителей, которые обычно используются в буферах для эукариотических клеточных культур (вплоть до 5 мМ ДТТ и 10 мМ ЭДТА, кратковременно до 100 мМ ЭДТА). Это значительно упрощает и ускоряет процесс выделения белка, так как у пользователя появляется возможность напрямую загружать большие объемы проб без предварительного удаления агентов, которые обычно вызывают отщепление ионов никеля. Микрочастицы AbiFlow Magnetic 100 Ni-AZUR Agarose хорошо видны невооруженным глазом, а магнитная природа носителя обеспечивает его быстрый и надежный захват стандартными магнитными устройствами. Основные характеристики AbiFlow Magnetic 100 Ni-AZUR Agarose приведены в таблице ниже.
* Микросферы с более узким диапазоном и другими средними размерами поставляются по договоренности
Cite as:
The protein was purified using AbiFlow Magnetic 100 Ni-AZUR Agarose beads (Abisense, Russia).
Ключевые слова
Magnetic His-Tag beads, Ni-NTA, Ni-AZUR, protein purification